Fill primogènit dels Reis Catòlics. El 1479 fou concertat el seu matrimoni amb Joana de Castella, la Beltraneja, però aquesta no s’hi avingué. Fou jurat hereu de Castella i Lleó (1480) a les corts de Toledo, i de Catalunya i Aragó (1481) a les de Barcelona i de Calataiud, respectivament. El 1483 fou negociat, sense èxit, el seu casament amb la reina Caterina I de Navarra. Fou present a Barcelona a l’arribada de Colom d’Amèrica. A la cort de Barcelona del 1493 jurà com a hereu les Constitucions de Catalunya. El 1495 es casà per poders a Malines, i el 1497 a Burgos personalment, amb l’arxiduquessa Margarida d’Àustria, filla de l’emperador Maximilià I. De complexió poc forta, hom n'atribuí la mort a la seva apassionada vida matrimonial. Les despulles són en un mausoleu d’alabastre, construït per Fancelli, al convent reial de Santo Tomás, d’Àvila.